徠卡顯微鏡解決色差，因為透鏡的焦距與透鏡區的規范化電位及線(xiàn)圈電流有關(guān)。當電子柬本身的能量有離散或透鏡區靜電位有起伏時(shí)，都將導致規范化電位的改變。這種電位的變化，或者透鏡的激勵電流不穩.又都會(huì )引起焦距的變化。它們將使軸上物點(diǎn)受到不同的偏轉，zui終與軸相交在不同處。在理想像平面中傷點(diǎn)與軸有了橫向偏離，從而形成模糊因斑。這種偏離稱(chēng)為中心色差。像平面或物平面中的色差模糊圓半徑分別為：為減小色差，在設計透鏡時(shí)應使c盡量小，因為色差系數c‘和極靴結構及透鏡的激勵情況有關(guān)。
有聚光鏡的顯微鏡則可將聚光鏡作上下移動(dòng)使其亮度適中，另外也可以改變可變光闡的孔徑以達到適中9b亮度。如果光線(xiàn)太陽(yáng)時(shí)，則可將聚光鏡作適當的向上升，可變光鬧的孔徑作適當的放大。如果光線(xiàn)太強則可將聚光鏡作適當的下降，可交光閏的孔徑作適當的減小。假如在這種情況下還感到刺眼，那末可選用適當的濾光片放置在聚光鏡下的托架上。這柞就能獲得使你滿(mǎn)意的亮度。當然在調節聚光鏡的上下位置利可變光閱的孔徑大小以及選用適合的濾光片，那是要經(jīng)過(guò)一定時(shí)期的實(shí)踐而取得經(jīng)驗的。
徠卡顯微鏡一個(gè)非常重要的問(wèn)題是在取材和分離細胞過(guò)程，冰凍干燥和樹(shù)脂包埋(FD)后冰凍超簿團片后，冰凍干燥后細跑各部位65元素成分含量中必須處理十分仔細，絕不能損傷待觀(guān)察分析的細胞。因為作x線(xiàn)微區分析不但步驟繁多，而且成本甚高，如果經(jīng)過(guò)長(cháng)時(shí)間及多步驟的處理后，所分析的細胞是受損傷的細胞或死細胞，得出錯誤的結論是非常遺憾的。如經(jīng)過(guò)膠元酶處理分離出的心肌細胞有兩種形態(tài)，一種是長(cháng)桿狀，另一種是圓形。后者是在細胞分離過(guò)程中受損傷的瀕死細胞。
可將肌纖維放在一特制的架上，使該肌纖維收縮達到某時(shí)相需要固定時(shí)，立即啟動(dòng)噴咀，使液態(tài)丙烷向肌纖維噴射，使之淬冷固定。然后再將肌纖維連同架子取出投入液氮中。如果固定血細胞或分離的細胞，首先低速離心使細胞集中，將細胞轉移到一個(gè)導熱性能良好的銀質(zhì)小管中、將該小管放入液態(tài)丙烷中獰冷固定。實(shí)驗室固定大鼠胰腺時(shí)，先將兩鋼塊用液氦(或液氮)預冷，用鉗夾住兩銅塊將其放在胰腺前后，使姨腺淬冷固定。組織或細胞淬冷固定后轉移到液氮中可長(cháng)期保存。
除目前zui推崇的冰凍超薄切片法外，在這里再介紹一種科學(xué)家們用過(guò)的沉積技術(shù)。在進(jìn)行分析前加入一種物質(zhì)，使之與待分析的成份形成沉積物以固定它，然后分析該沉積物。例如，人們常用草酸鹽與焦銻酸鹽去沉積肌細胞中的ca。前者對胞漿中低濃度的ca敏感性不夠高；焦銻吱鹽的敏感性高些，可與腦漿中游離ca形成電子致密的沉積物，但焦銻酸鹽與鈉、錳、鋇、鐵也形成沉積物，特異性較差。標本制備過(guò)程類(lèi)似于普通透射電鏡超薄切片標本的制備，不同之處在于固定前3%焦銻酸鉀固定6小時(shí)，在染色的肌肉超薄切片上，在每個(gè)肌節的A帶和2帶的中線(xiàn)可見(jiàn)黑色沉淀物、再用未染色的切片做X射線(xiàn)微區分析。曾用二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸(DAB)去沉淀含血紅素的物質(zhì)等等。這種組化的沉淀反應與x射線(xiàn)微區分橋聯(lián)合應用在不具備冰凍超薄切片條件的實(shí)驗室可考慮采用。根據待分析元素的峰高可做半定量。
